Saviez-vous qu'il y a trois aspects de votre instrument de détection qui peuvent avoir un impact sur la quantité d'informations utiles que vous obtenez de chaque plaque ?

Les instruments peu sensibles peuvent vous faire manquer des échantillons avec un faible signal qui pourraient être la "découverte" que vous recherchez. Les instruments ayant une plage de détection étroite limitent la précision ou la reproductibilité dont vous avez besoin pour reproduire vos expériences.

Enfin, les instruments qui permettent au signal lumineux de se propager dans les puits adjacents favorisent l'apparition de cross-talk et faussent les résultats expérimentaux.

 

La sensibilité de l’instrument:

Certains instruments nécessitent un réglage du gain, qui contrôle la tension du détecteur, le rendant plus ou moins sensible en fonction du signal provenant du puits.

Une fois réglé, ce réglage du gain s'applique à chaque échantillon dans la microplaque mesurée. Pour les instruments prétendant avoir un réglage automatique du gain, le gain doit être réglé manuellement avant que des ajustements "automatiques" ultérieurs ne puissent se produire. Avec ces instruments, si le signal provenant d'un seul puits est trop intense, il peut saturer le détecteur. Lorsque cela se produit, vous devez réduire le gain pour toute la microplaque. Cela signifie que les échantillons moins intenses dans cette microplaque seront également lus en utilisant le même réglage de gain, même s'il n'est pas optimal pour leur signal.

En revanche, si le signal sur la plaque est trop faible, le gain doit être ajusté pour intensifier le signal. Si vous n'ajustez pas le gain, vous perdrez le signal de ces puits dans le bruit et risquez de manquer des "découvertes" importantes.

Les instruments manquant de sensibilité devront avoir le gain ajusté pour lire des échantillons dont les signaux se situent en dehors de la plage de détection.

Lorsque les plaques contiennent des échantillons avec une large gamme de signaux, réinitialiser le gain et relire la plaque représente beaucoup de travail supplémentaire. Mais que faire si vous avez à la fois des intensités faibles et élevées sur la même microplaque ? Comment régler le gain ? Si vous réglez le gain au milieu pour capturer la plupart des échantillons les plus faibles et la plupart des échantillons les plus élevés, vous sacrifiez les résultats pour les échantillons aux deux extrêmes.

Si vous réglez le gain pour les échantillons les plus faibles, vous acceptez que certains des échantillons les plus intenses saturent le détecteur et ne donnent pas une mesure précise. Lorsque le gain est réglé pour capturer les signaux les plus intenses, vous manquerez les signaux de faible intensité. Toutes ces manipulations ajoutent de l'incertitude à chaque fois que vous effectuez votre expérience.

La solution à ce dilemme est un vrai réglage automatique du gain qui fournit le réglage optimal pour chaque échantillon, faible ou intense, au sein de la même microplaque. Un véritable réglage automatique du gain, comme celui proposé par les instruments GloMax®, signifie que le gain est automatiquement ajusté en temps réel pour chaque échantillon mesuré, sans intervention manuelle. Cela garantit les meilleurs résultats possibles.

 

Plage de détection de l’instrument :

Avec des échantillons expérimentaux, vous ne pouvez pas toujours prédire ceux qui donneront des signaux faibles ou élevés. Vous avez toujours besoin que vos résultats d'analyse soient à la fois précis et reproductibles. Si votre instrument a une plage de détection étroite, vous devrez deviner quelles conditions d'analyse sont nécessaires lorsque vous préparez votre expérience.

Si vos échantillons saturent le détecteur, vous devrez revoir votre expérience et espérer qu'ils sont maintenant dans la plage de détection appropriée. Si vos échantillons se trouvent en dessous de la plage de détection de l'instrument, vous ne pourrez peut-être pas les distinguer du bruit de fond, et vous ne les détecterez jamais ou devrez modifier votre conception expérimentale d'une manière ou d'une autre et répéter l'analyse.

Les instruments avec une plage de détection trop étroite ne vous donneront pas de bons résultats pour les puits avec un signal trop faible ou trop fort.

Les signaux des puits trop faibles ne peuvent pas être distingués du bruit de fond, tandis que les puits avec un signal trop fort vont saturer le détecteur, donnant des résultats inexacts.

Les instruments avec une large plage de détection peuvent lire des signaux à faible et à fort niveau, garantissant que vos résultats d'analyse sont précis sur toute votre plaque sans manipulation supplémentaire. En particulier, les instruments GloMax® peuvent mesurer des signaux intenses et faibles pour vous permettre d'effectuer vos expériences à des niveaux physiologiques.

 

Le Cross-talk :

Il est difficile de toujours savoir quels échantillons expérimentaux donneront des signaux intenses et ceux qui donneront des signaux faibles. Cela peut rendre la l’organisation des puits de votre plaque aléatoire et compliquée. Pour la plupart des lecteurs de plaques, un signal intense finit souvent par se propager dans les puits adjacents. Lorsque cela se produit, cela peut influencer vos conclusions car vos résultats ne sont pas précis. L'impact de ce cross-talk sur vos analyses dépend de la quantité de cross-talk autorisée par votre lecteur de plaques.

Pour éviter cela, vous pourriez concevoir votre expérience de sorte qu'il y ait des puits vides entre vos échantillons ; cependant, cela réduit considérablement le nombre d'échantillons que vous pouvez mesurer par plaque. Cela vous oblige également à concevoir votre expérience en fonction des performances de votre lecteur de plaques. Les instruments GloMax® ont une conception à double masquage qui vous donne un résultat réel pour chaque puits et élimine les problèmes de contamination du signal par cross-talk.

Conclusion

Beaucoup de temps et d'efforts sont consacrés à chaque plaque d'analyse. La dernière chose dont vous devriez vous préoccuper est de manquer des résultats expérimentaux importants parce que votre instrument de détection ne fonctionne pas au niveau requis. Ne laissez pas ces trois problèmes courants limiter les résultats de vos analyses. Le choix du bon instrument vous donnera l'assurance que vos résultats d'analyse seront précis et fiables.